miExpress? miRNA前體表達(dá)克隆
MicroRNA ( miRNA ) 是真核細(xì)胞轉(zhuǎn)錄形成的非編碼單鏈小分子RNA。它們的序列高度保守,通常是21到23個(gè)核苷酸長(zhǎng)度,幾乎與所有的細(xì)胞功能和基因表達(dá)調(diào)控有關(guān)。它們通過靶定到mRNA 3’非翻譯區(qū)(3′ UTR)來調(diào)節(jié)基因的表達(dá)。MicroRNA靶標(biāo)基因的表達(dá)失調(diào)與癌癥、 心血管疾病等各種疾病的發(fā)生有關(guān)。復(fù)能基因提供eGFP作為報(bào)告基因的miExpress? miRNA前體表達(dá)克隆,將miRNA的莖環(huán)前體(約150核苷酸)克隆到病毒和非病毒載體可以感染幾乎所有細(xì)胞。
圖1. miRNA前體表達(dá)克隆和miRNA 3′ UTR克隆在miRNA調(diào)控過程中的作用機(jī)理
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