GLuc-ON? 轉(zhuǎn)錄響應(yīng) （TRE）克隆

復(fù)能基因?yàn)槟峁?nbsp;GLuc-ON? 轉(zhuǎn)錄響應(yīng) (TRE) 克隆，用于在哺乳動(dòng)物細(xì)胞系上進(jìn)行快速靈敏的信號(hào)通路分析。這些克隆使用分泌型的 Gaussia Luciferase (GLuc) 作為報(bào)告基因，通過靈敏而顯著的熒光反應(yīng)，檢測(cè)特定信號(hào)通路對(duì)環(huán)境刺激物或其他實(shí)驗(yàn)操作的生物應(yīng)答。GLuc基因是一個(gè)分泌型的蛋白，無需裂解細(xì)胞就能從培養(yǎng)基中獲得實(shí)驗(yàn)樣本進(jìn)行快速方便的檢測(cè)。 GLuc-ON? 轉(zhuǎn)錄響應(yīng) (TRE) 克隆能為以下研究應(yīng)用提供強(qiáng)大助力：

• 藥物發(fā)現(xiàn)或驗(yàn)證：鑒定刺激或抑制目標(biāo)信號(hào)通路的小分子。

• 分析細(xì)胞對(duì)蛋白質(zhì)或多肽的應(yīng)答反應(yīng)。

• 分析細(xì)胞對(duì)激素的應(yīng)答反應(yīng)。

• 功能基因組學(xué)研究：分析某個(gè)信號(hào)通路對(duì)基因激活、過表達(dá)、沉默、敲除或突變的反應(yīng)。

• 病毒感染分析：分析細(xì)胞對(duì)病毒感染的應(yīng)答反應(yīng)。

圖 1. 功能基因組學(xué)研究：通過TRE 克隆分析Oct4基因過表達(dá)的表型

HEK293a 細(xì)胞分組轉(zhuǎn)染Oct4 TRE 克隆+GFP表達(dá)克隆、Oct4 TRE 克隆+Oct4表達(dá)克隆、陰性對(duì)照克隆+GFP表達(dá)克隆以及陰性對(duì)照克隆+Oct4表達(dá)克隆。轉(zhuǎn)染24小時(shí)后進(jìn)行Gaussia 熒光素酶分析，轉(zhuǎn)錄活性值的變化表達(dá)為熒光量的相應(yīng)增幅倍數(shù)。

圖 2. GLuc-ON TRE 克隆工作原理

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