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產品信息
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NGSquant? Library qPCR Kit for Ion Torrent?
NGSquant? Library qPCR Kit for Ion Torrent 是一套基于 qPCR 方法對 Ion Torrent 平臺測序文庫進行 DNA 分子數絕對定量分析的試劑盒。它可以對兩端含有 Ion Torrent A、trP1 芯片序列的各種類型 DNA 片段文庫進行高特異性的快速定量，檢測結果靈敏度高，準確度高，重復性好，適用于大多數qPCR儀器。
產品優(yōu)勢
靈敏度高 —能檢出低至 0.0083 pM 的文庫樣品；
特異性強 —使用抗體修飾法熱啟動 DNA 聚合酶，避免了 PCR 擴增前的非特異性結合；文庫定量引物采用特殊算法設計，不會形成引物二聚體；
擴增范圍廣—能檢測平均片段長度 1 kb 以內的文庫；
擴增效率高（E>0.92），實驗重復性好（R2 >0.99）。
本試劑盒包含以下四種成分：
1. 文庫DNA定量標準品（qPCR DNA standard for Ion Torrent）：經過精確定量和嚴格質控的六份十倍比梯度稀釋的雙鏈DNA片段溶液（83 pM – 0.00083 pM），用于標準曲線制作；
2. 文庫定量引物（qPCR primer Mix for Ion Torrent）：匹配Ion Torrent A和trP1芯片序列、并經過優(yōu)化設計的一對qPCR引物；
3. 2×qPCR預混液（2×qPCR Mix for Ion Torrent）：含有經性能優(yōu)化的熱啟動DNA聚合酶、qPCR反應緩沖液和SYBR Green染料等qPCR反應所需成分；
4. ROX參比染料（ROX Reference Dye）。
圖1.DNA標準品擴增曲線與熔解曲線。使用NGSquant? Library qPCR Kit for Ion Torrent檢測6個10倍梯度稀釋的文庫DNA定量標準品，每個標準品平行重復2次。結果顯示，試劑盒具有靈敏度高、特異性強、重復性好的特性。
圖2.DNA標準品擴增產物電泳圖。使用NGSquant? Library qPCR Kit for Ion Torrent擴增文庫DNA標準品得到的qPCR產物，電泳顯示條帶均一，無非特異擴增現象。