All-in-One? validated qPCR primers
All-in-One? miRNA qRT-PCR 系列試劑盒包括All-in-One? miRNA qRT-PCR Detection Kit 2.0(miRNA檢測試劑盒)、All-in-One? miRNA First-Strand cDNA Synthesis Kit 2.0(miRNA逆轉錄試劑盒)和All-in-One? miRNA qPCR Kit(miRNA定量試劑盒)。本系列產品與All-in-One? Validated miRNA Primers 或者 miProfile? miRNA qPCR Arrays配套使用,可用于miRNA表達量的高效檢測。
由Poly A聚合酶、逆轉錄酶,以及專為All-in-One?試劑特別研發(fā)的PAP/RT反應緩沖液組成的一種新穎的、優(yōu)化的反轉錄混合試劑,使以上兩種用于成熟miRNA逆轉錄(cDNA合成)反應的酶獲得最佳活性。
All-in-One? qRT-PCR Detection Kit 2.0包括RT(逆轉錄)和qPCR(定量檢測)兩部分試劑,利用基于SYBR? Green的qPCR技術,可對低至20 pg的Total RNA(或者低至10 pg的small RNA)進行快速、準確定量。
產品優(yōu)勢
All-in-One? miRNA系列試劑靈敏度高、特異性強、性價比高
可對檢測低至20 pg的Total RNA(或者低至10 pg的small RNA)
可與miProfile? miRNA表達量定量檢測陣列或All-in-one?特異miRNA驗證引物配套使用
All-in-One? miRNA檢測試驗快速、簡便
圖1. All-in-One? miRNA qRT-PCR Detection Kit 2.0的實驗流程。在3’poly A加尾反應后,M-MLV逆轉錄酶和一種獨特的Oligo dT Adaptor primer從3’端開始進行逆轉錄;以All-in-One? miRNA qPCR primer和Universal Adaptor PCR Primer作為上下游引物,試劑盒中包含SYBR? Green I的qPCR Mix對經過反轉錄的miRNA進行特異檢測。
以上檢測試劑產品與GeneCopoeia提供的下列miRNA質粒構建和實驗相結合,可廣泛用于miRNA功能分析研究。
驗證引物
每條All-in-One? miRNA 特異驗證引物均使用專利算法設計并經過實驗確證。
在miRNA定量PCR試驗中,該系列驗證引物與基于SYBR? Green I 的All-in-One? miRNA qRT-PCR Kit配套使用,性能可靠,重復性好。
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qPCR array
miProfile? miRNA PCR Array為檢測不同組織或細胞中特定miRNA的表達量而設計,這些miRNA按照目錄產品或定制要求成套設置。
每塊96孔板包含84對PCR引物(正向引物:miRNA特異引物;反向引物:通用引物)。miRNA特異引物都經實驗驗證,融解曲線均呈單一銳鋒,電泳條帶均呈單一條帶,且與擴增產物相符。
使用普通的實時定量PCR反應條件,即可簡便進行高通量的miRNA表達量檢測和分析。
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